FlowCellect ヒト ES 細胞 (HESCA-1) 表面マーカー分化解析キット

FlowCellect ヒト ES 細胞 (HESCA-1) 表面マーカー分化解析キット

FlowCellect

ミリポアのFlowCellect™ ヒトES細胞表面マーカー分化解析キットは、表面マーカーとなるHESCA-1、SSEA-4、SSEA-1の発現をより簡単且つ迅速に追跡するよう設計されています。また本キットは、HESCA-1及びSSEA-4を発現して、SSEA-1を発現しない細胞の割合を判定することで、培養における未分化ヒトES細胞の割合も判定します。この迅速な試験により、培養中の細胞の品質を判定できるだけでなく、分化のプロトコール中に起きるマーカー発現の変化も観察することができます。

25サンプル分（3色）及び5つのアイソタイプコントロールのアッセイに十分な試薬を提供致します。キットには解析に必要な蛍光標識抗体とバッファーが全て最適化された状態で同梱されています。すべての抗体は、HESCA-1、SSEA-4またはSSEA-1を発現しないENSTEM-A細胞株に対する試験により特異性が確認されております。また、付属のセルストレーナーにより、解析結果の変動原因となり得る、サンプル中の凝集細胞を取り除きます。さらに、解析に役立つ、アッセイの詳細な説明書も含まれていますので、フローサイトメトリー解析に適した正確な細胞濃度を得ることができます。

ヒトES細胞（hESC）は、多能性細胞としてin vitroで維持でき、培養条件の操作により、多くの細胞種に分化するよう誘導できるという点でユニークな細胞です。そのため、hESCは、細胞ベースの治療法に用いる細胞を無制限に供給できるという可能性がある他に、基本的なヒトの発生生物学を研究するための手段となる可能性もあります。そうした理由から、特異的な発生系譜に従ってhESCの分化を人為的に操作することに、より一層関心が集まっています [1-4]。

現在、hESCの未分化状態の試験に最も利用されている手法は、OCT-4、NANOG、アルカリホスファターゼ、SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60、TRA-1-81というタンパク質の発現解析ですが [5]、FlowCellect™ ヒトES細胞HESCA-1表面マーカー発現キットでは、未分化のhESCの検出に、新規hESCマーカーであるHESCA-1（ヒトES細胞抗原1）を使用します。HESCA-1モノクローナル抗体は、H1、BG-01、BG01v、BF02ヒトES細胞株に陽性ですが、奇形腫及びMEF、D-551、Hs27などの一般的なフィーダー細胞株において分化した幹細胞には反応しません。胎児性抗原（stage specific embryonic antigen）であるSSEA（SSEA-1、SSEA-3、SSEA-4）も未分化hESCの優れたマーカーです（7）。SSEAの抗体は、関連する糖脂質（GSL）上のエピトープを認識します（8）。SSEA-4抗体はGSL-7上の末端シアル酸を認識します（8）。レチノイン酸を処理すると細胞が分化し、ヒトES細胞でのSSEA-4の発現レベルは低下し、やがてSSEA-1の発現レベルが増加します（10）。

FlowCellect™ ヒトES細胞HESCA-1表面マーカー分化解析キットでは、蛍光色素を結合させた抗体を用いてHESCA-1、SSEA-4、SSEA-1を検出します。本キットは、青色レーザー（488mm）を搭載したフローサイトメーター用に特別に設計されており、ICC、IHCやHTS、ウェスタンブロット法またはその他のいかなる蛍光分析プラットホームなどの顕微鏡法アプリケーションにおいて使用できるものではありません。このキットには培地および一般的な実験室で簡単に入手できるような材料は含まれていません。

フローサイトメトリー

Human

• 製品のカタログまたは、製品に添付されている弊社発行の資料で特に明記されない限り、弊社の製品は、研究用途のみを目的としており、その他のいかなる目的（無断での商業目的の使用、in vitro診断への使用、ex vivoまたはin vivo治療への使用、あるいは、ヒトまたは動物へのいかなる使用及び適用を含むが、これに限らない）のために使用することはできません。
• Alexa Fluor® は、Molecular Probes, Inc.の登録商標です。

すべてのキット内容についてロット間の工程内試験を実施

幹細胞キット

Stem Cell

幹細胞研究

ヒト胚性幹細胞

キャラクタリゼーション

• 1.10×洗浄バッファー：(Part No. CS202123)　 1ボトル13 mL入り
• 2.固定化バッファー：(Part No. CS202122) 1ボトル　13 mL入り
• 3.5×アッセイバッファー：(Part No. CS202124) 1ボトル　55 mL入り
• 4.20×IgM-FITC アイソタイプコントロール：(Part No. CS202395) 1バイアル75 μL入り
• 5.20×IgG3-PE アイソタイプコントロール：(Part No. CS202405) 1バイアル75 μL入り
• 6.20×IgM-PE/CY5 アイソタイプコントロール：(Part No. CS202397)　 1バイアル75 μL入り
• 7.20×HESCA-1-FITC: (Part No. CS202401) 　 1バイアル150 μL入り
• 8.20×SSEA-4-PE：(Part No. CS202399) 　 1バイアル150 μL入り
• 9.20×SSEA-1-PE/CY5：(Part No. CS202400) 　 1バイアル150 μL入り
• 10.Steri-flipセルストレーナー（60 µm）：（カタログ番号SCNY00060）

4–8 ℃：6ヶ月

Mouse

¹²⁵I

• FUT4
• SSEA-4
• HESCA-1

Flow Cellect

ExpressPro

Monoclonal Antibody

研究