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Purification des produits de réactions de séquençage

Kit Montage SEQ96 Cleanup et plaque de filtration MultiScreen SEQ384

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Kit Montage SEQ96 Sequencing Reaction Cleanup

Les plaques de filtration utilisant une membrane de filtration par exclusion de taille donnent des séquences de qualité

       • Protocole d'une durée de 10 minutes, en utilisation sous vide
       • Compatibles avec une large gamme de matrices ADN
       • Optimisées pour une utilisation avec la chimie BigDye
       • Disponibles dans les formats 96 et 384 puits
       • Automatisables

Protocole rapide, en utilisation sous vide

Les plaques de filtration SEQ de Millipore intègrent la technologie brevetée de filtration par exclusion de taille et permettent d'obtenir des produits de réaction de séquençage hautement purifiés. En plus d'éliminer les étapes de centrifugation, les plaques ne requièrent aucune récupération de filtrat ni aucune préparation de colonnes.


Le protocole fonctionnant sous vide a été conçu pour une utilisation avec les séquenceurs automatisés d'ADN, à savoir les systèmes ABI PRISM® et MegaBACE® d'Amersham Biosciences.

Uniformité améliorée

La technologie d'exclusion de taille élimine la variabilité lors de la purification des produits de séquençage. En utilisant une membrane, le protocole élimine ainsi l'étape de précipitation à l'alcool. Il n'y a donc plus aucun risque que des sels ou de l'éthanol affectent la qualité de la séquence. En plus d'indices de qualité élevés, des résultats fort reproductibles sont obtenus avec les matrices PCR et plasmidiques préparées selon diverses méthodes.

Protocole

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1.Introduisez les échantillons dans les puits.
2.Filtrez en utilisant le support Montage, de filtration sous vide, pendant 6 minutes ou jusqu'à ce que les puits soient secs. L'ADN est retenu à la surface de la membrane alors que les sels et les Dye terminators s'éliminent par filtration.
3.Lavez, remettez en suspension et récupérez l'ADN.

Performances

Kit Montage SEQ96 Sequencing Reaction Cleanup avec matrice PCR

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Un produit de PCR de 657 bp (10 fmol) a été purifié à l'aide de la plaque de filtration Montage PCRµ96 et séquencé grâce à une réaction 1/8 x BigDye Terminator v1.1. Après purification à l'aide du kit Montage SEQ96 Sequencing Reaction Cleanup, les échantillons ont été analysés sur un séquenceur d'ADN ABI PRISM 3700. Avec cette approche, la première base après l'amorce est facilement détectable.

Protocoles plus rapides, résultats améliorés
MéthodeDurée du traitementValeurs Phred 20 typiquesIndice de qualité moyen
Kit Montage SEQ9610 minutes680> 97
Concurrent Q, Système d'élimination des Dye terminators par séparation sur gel*, 96 puits55 minutes63094
*Protocole recommandé par le fabricant


Guide d'achat  (retourner en haut de cette page)

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Comparer Référence Description Composants Qté  
LSKS09601 Kit Montage SEQ96 Sequencing Reaction Cleanup comprend les plaques de filtration à 96 puits et la solution d'injection 1 » Ajouter à la commande
LSKS09604 Kit Montage SEQ96 Sequencing Reaction Cleanup comprend les plaques de filtration à 96 puits et la solution d'injection 4 » Ajouter à la commande
LSKS09624 Kit Montage SEQ96 Sequencing Reaction Cleanup comprend les plaques filtrantes à 96 puits et la solution d'injection 24 » Ajouter à la commande
S384SEQ10 Plaque de filtration MultiScreen SEQ384 (réactifs non compris) 10 » Ajouter à la commande
S384SEQ50 Plaque de filtration MultiScreen SEQ384 (réactifs non compris) 50 » Ajouter à la commande
Réactifs

Comparer Référence Description Volume, ml Qté  
LSKSBW500 Solution de lavage Montage, 0,5 litre 500 1 » Ajouter à la commande
LSKSIS500 Solution d'injection Montage, 0,5 litre 500 1 » Ajouter à la commande
Equipement requis

Comparer Référence Description Qté  
MSVMHTS00 Support de filtration sous vide MultiScreenHTS 1 » Ajouter à la commande
SAVM38401 Support de filtration sous vide MultiScreen384 1 » Ajouter à la commande
WP6111560 Pompe à vide/pression résistante aux solvants, 115 V/60 Hz 1 » Ajouter à la commande
WP6122050 Pompe à vide/pression résistante aux solvants, 220 V/50 Hz 1 » Ajouter à la commande
WP6110060 Pompe à vide/pression résistante aux solvants, 100 V/50–60 Hz 1 » Ajouter à la commande
XX1004705 Fiole à vide, 1 litre 1 » Ajouter à la commande
SLFG05010 Unité de filtration Millex-FG, 0,20 µm, PTFE hydrophobe, 50 mm 10 » Ajouter à la commande
XX7100004 Tuyau en silicone D.I. 4,5 mm (3/16"), longueur 140 cm 1 » Ajouter à la commande
XX1004708 Bouchon perforé n° 8, silicone 5 » Ajouter à la commande
Le support de filtration sous vide MultiScreen384 peut être utilisé avec les plaques de filtration 96 et 384 puits


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