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Purificazione delle reazioni di sequenza

Kit di purificazione Montage SEQ96 e piastre MultiScreen SEQ384

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Kit Montage SEQ96 per la purificazione delle reazioni di sequenza

Mediante filtrazione su membrana ad esclusione dimensionale, queste piastre consentono di ottenere sequenze di alta qualità

       • Il protocollo richiede l'impiego del vuoto e dura 10 minuti
       • Compatibili con un gran numero di templati di DNA
       • Ottimizzati per l'impiego con i terminatori BigDye
       • Disponibili nel formato a 96 e 384 pozzetti
       • Automatizzabili

Protocollo veloce con l'impiego del vuoto

Per ottenere reazioni di sequenza ad elevata purezza, le piastre SEQ Millipore incorporano una membrana brevettata ad esclusione dimensionale. Oltre ad evitare l'uso della centrifuga, le piastre non richiedono la raccolta del filtrato o l'impaccamento delle colonne.


Il protocollo che si basa sull'impiego del vuoto è stato ideato per l'impiego con i sequenziatori di DNA automatizzati, compresi i sistemi ABI PRISM® e MegaBACE® Amersham Biosciences.

Maggiore riproducibilità

La purificazione mediante esclusione dimensionale elimina la variabilità che solitamente caratterizza la purificazione delle reazioni di sequenza. Poiché il protocollo che impiega la filtrazione su membrana non prevede la precipitazione con alcol, non c'é il rischio che i sali o l'etanolo influiscano sui risultati finali del sequenziamento. Oltre ad elevati tassi di successo, con PCR e con templati di DNA plasmidico preparati in svariati modi, si ottengono risultati altamente riproducibili.

Protocollo

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1.Introdurre i campioni nei pozzetti.
2.Filtrare per 6 minuti o fino a portare i pozzetti a secco, utilizzando il supporto da vuoto Montage. Il DNA sarà trattenuto sulla superficie della membrana, mentre sali e terminatori fluorescenti saranno eliminati con la filtrazione.
3.Lavare, risospendere e recuperare il DNA dall'alto.

Prestazioni

Kit Montage SEQ96: purificazione di reazione di sequenza ottenuta da templato di PCR

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Un prodotto di PCR di 657 pb (10 fmoli) è stato purificato con una piastra Montage PCRµ96 e sequenziato con una reazione 1/8 x BigDye Terminator v 1.1. Dopo essere stati purificati con il kit Montage SEQ96, i campioni sono stati analizzati su un sequenziatore ABI PRISM 3700. Con questo approccio, la prima base dopo il primer è facilmente riconoscibile.

Protocolli più veloci, risultati migliori
MetodoTempo richiestoValori tipici
di Phred 20
Tasso di successo
medio
Kit Montage SEQ9610 minuti680>97
Sistema per la rimozione dei terminatori fluorescenti basato sulla gel-filtrazione a 96 pozzetti, marchio Q*55 minuti63094
*Con il protocollo consigliato dal produttore


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Si prega di selezionare al massimo 5 prodotti da confrontare.

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LSKS09601 Kit Montage SEQ96, per la purificazione delle reazioni di sequenza comprende le piastre filtranti a 96 pozzetti e la soluzione di iniezione 1 » Aggiungere all'ordine
LSKS09604 Kit Montage SEQ96 Cleanup, per la purificazione delle reazioni sequenza comprende le piastre filtranti a 96 pozzetti e la soluzione di iniezione 4 » Aggiungere all'ordine
LSKS09624 Kit Montage SEQ96 Cleanup, per la purificazione delle reazioni sequenza comprende le piastre filtranti a 96 pozzetti e la soluzione di iniezione 24 » Aggiungere all'ordine
S384SEQ10 Piastre MultiScreen SEQ384 Non comprende i reagenti 10 » Aggiungere all'ordine
S384SEQ50 Piastre MultiScreen SEQ384 Non comprende i reagenti 50 » Aggiungere all'ordine
Reagenti

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LSKSBW500 Soluzione di lavaggio Montage, 0,5  L 500 1 » Aggiungere all'ordine
LSKSIS500 Soluzione di iniezione Montage, 0,5 L 500 1 » Aggiungere all'ordine
Attrezzatura richiesta:

Paragonare Numero di catalogo Descrizione Qtà/conf  
MSVMHTS00 Supporto da vuoto per piastre MultiScreenHTS 1 » Aggiungere all'ordine
SAVM38401 Supporto da vuoto per piastre MultiScreen384 e MultiScreen PCRµ96 1 » Aggiungere all'ordine
WP6111560 Pompa Chemical Duty, 115 V/60 Hz 1 » Aggiungere all'ordine
WP6122050 Pompa Chemical Duty, 220 V/50 Hz 1 » Aggiungere all'ordine
WP6110060 Pompa Chemical Duty, 100 V/50–60 Hz 1 » Aggiungere all'ordine
XX1004705 Beuta da vuoto, 1 L 1 » Aggiungere all'ordine
SLFG05010 Filtri Millex-FG da 0,20 µm, PTFE idrofobo, 50 mm 10 » Aggiungere all'ordine
XX7100004 Tubo in Silicone con DI 3/16", 140 cm 1 » Aggiungere all'ordine
XX1004708 Tappi N° 8 perforati in silicone 5 » Aggiungere all'ordine
Il supporto da vuoto MultiScreen384 può essere utilizzato sia con le piastre a 96, sia a 384 pozzetti


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