Montage® Antikörper-Aufreinigungs-Kits

Antikörper-Aufreinigung durch Zentrifugation: ein neues Verfahren

Montage Antikörper-Aufreinigungs-Kits sind für die schnelle und einfache Aufreinigung von Antikörpern aus Serum, Ascites oder Nähr lösungen konzipiert. Die Kits bestehen aus Zentrifugations-Säulen, die mit leistungsstarken PROSEP-A oder -G Medien vorgepackt sind. Sie benötigen keine Pumpen. Kein Packen der Säulen. Sie brauchen lediglich eine Zentrifuge zur Aufreinigung von 10 - 20 mg in weniger als 60 Minuten.

Das Protokoll ist leicht anwendbar und der Einsatz von Zentrifugation für die Aufreinigung im Gegensatz zu herkömmlichen Gravitations flussverfahren benutzerfreundlich.

Die Ergebnisse zeigen, dass die Zentri fugations-Säulen ohne Verlust von Bindungs kapazität oder verringerte Spezifität bis zu 10-mal regeneriert werden können.

Leistung (zurück nach oben)

Wiederverwendung der Zentrifugations-Säule

Menschliches IgG wurde 10-mal aus normalem Serum unter Einsatz einer regenerierten PROSEP‑G Zentrifugations-Säule aufgereinigt.

Aufreinigung monoklonaler Antikörper

Monoklonales Maus-IgG wurde mit einer PROSEP‑A Zentrifugations-Säule aus Ascites aufgereinigt. (Spur 1: unaufgereinigte Ascites. Spur 2: Erstes Eluat nach Auftragen der Aszites. Spur 3: Eluat nach Waschvorgang. Spur 4: 5 µg aufgereinigter Antikörper.) Mit freundlicher Genehmigung von Exalpha Biologicals.

Bindungsaffinitäten von Protein A und Protein G
Protein	A	G		Protein	A	G
Menschliches IgG1	++	++		Ratten-IgM	+ /--	-
Menschliches IgG2	++	++		Hasen-IgG	++	++
Menschliches IgG3	--	++		Hamster-IgG	+	++
Menschliches IgG4	++	++		Meerschweinchen-IgG	++	+
Menschliches IgA	+	--		Rind-IgG	+	+
Menschliches IgD	+	--		Schaf-IgG	+ / --	+
Menschliches IgE	+	--		Ziegen-IgG	+ /--	+
Menschliches IgM	+	--		Schwein-IgG	++	++
Maus-IgG1	+	+		Huhn-IgG	--	+ /--
Maus-IgG2a	++	++		Fragmente
Maus-IgG2b	++	++		Menschliches Fab	+	+
Maus-IgG3	+	++		Menschliches F(ab')2	+	+ /--
Maus-IgM	+ /--	--		Menschliches ScFv	+	--
Ratten-IgG	++	++		Menschliches Fc	+	--
Ratten-IgG1	+ /--	+		Menschliches K	--	--
Ratten-IgG2a	+ /--	++		Menschliches	--	+
Ratten-IgG2b	+ /--	+
Ratten-IgG2c	+ /--	+
Legende: ++ = Starke Affinität; + = Mäßige/leichte Affinität; +/-- = Erfordert Austesten; -- = Keine Affinität

Spezifikationen (zurück nach oben)

Kit-Inhalt	Bestehend aus: Zentrifugations-Säulen, Puffern, Probenvorbereitungs- und Konzentrierungseinheiten
Unterstützendes Matrixmaterial	Poröses Glas
Medienpartikelgröße, µm	75–125
Medienbettvolumen, µl	1600
Bindungskapazität
Protein A	>20 mg Hasen-IgG
Protein G	>10 mg Hasen-IgG
pH-Wert-Bereich	2–9
Maximales Volumen, ml	20 (maximal im Schwingkopfrotor)
Lagertemperatur, °C
Farbringkodierte Endkappen
Protein A	Rot
Protein G	Gelb

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